Главная


скачать форекс торрент

Антителозависимая клеточная цитотоксичность. Оценка результатов

Для подсчета количества специфически высвободившегося 51Сг можно пользоваться следующей формулой:

где: эксп. — радиоактивность, высвобождающаяся при лизисе «нагруженных» антителами клеток-мишеней эффекторными клетками; спонт. — радиоактивность, высвобождающаяся в смеси, содержащей только клетки-мишени и эффекторные клетки; макс.— радиоактивность, высвобождающаяся при многократном замораживании и оттаивании клеток или при их обработке детергентами.

Вышеприведенную формулу используют только в случае, если спонтанное высвобождение не слишком велико. В случае, если оно составляет свыше 30%, используют формулу:

где общ.— общая радиоактивность пробы (осадок и надосадочная фракция)

Измерение высвобождения 51[Сг] при подходящих условиях опыта позволяет оценить активность киллеров. Высвобождение изотопа при 15—75% цитолизе прямо пропорционально логарифму концентрации эффекторных клеток. Если соотнести специфическое высвобождение 51[Cr] с логарифмом соотношения эффекторные клетки/клетки-мишени, то получается прямая, при помощи которой можно подсчитать количество эффекторных клеток, необходимое для 50% цитолиза (1 литическая единица).

К-клеточная активность мононуклеарных лейкоцитов крови человека,
определяемая при помощи нагруженных антителами клеток лейкоза мышей

К-клеточная активность мононуклеарных лейкоцитов крови человека,

Состав пробы: 104 клеток-мишеней (клетки лейкоза мышей Gr/E), ак-ти-Gr/E — сыворотка (1 : 100); соотношение эффекторных клеток и клеток-мишеней—2 : 1, 10 : I, 50 : 1. Из точки пересечения кривой зависимости доза — эффект с линий 50% лизиса следует, что 1 литическая единица (количество эффекторных клеток, вызывающее 50% лизис) соответствует приблизительно 10-кратному избытку эффекторов, т. е. в условиях данного опыта около 105 клеток.

Метод позволяет сравнивать активность различных популяций эффекторных клеток. Клеточную цитотоксичность можно также рассматривать как ферментативную реакцию. В этом случае можно определить соответствующие кинетические параметры в условиях постоянного числа эффекторных клеток и переменного числа клеток-мишеней.